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La PCR est une méthode utilisée par les scientifiques pour réaliser des millions de copies d’un segment d’ADN. Les polymérases - un type d’enzyme protéique - aident à produire de nouveaux segments. Les scientifiques utilisent souvent la polymérase Taq dans la PCR.
Histoire
La Taq polymérase provient de la bactérie Thermus aquaticus, qui vit dans les eaux thermales. Kary Mullis et Fred Faloona ont développé la PCR au milieu des années 1980 en utilisant à l'origine la polymérase d'Escherichia coli, mais les scientifiques ont rapidement commencé à utiliser le Taq en PCR car il était plus résistant aux températures élevées.
Fonction
La PCR implique les étapes de dénaturation, d'annelage et de réplication, généralement répétée 20 à 30 fois. La dénaturation sépare le double brin de l'ADN en brins isolés. Dans l'étape de recuit, les amorces se lient aux segments d'ADN à copier. La Taq polymérase commence à travailler sur l'étape de réplication: la polymérase assemble, à partir de chaque simple brin d'ADN marqué par une amorce, un nouveau double brin.
Les avantages
Les températures élevées requises pour dénaturer l'ADN ont détruit la polymérase de E. coli utilisée à l'origine dans la PCR, nécessitant l'ajout d'enzyme supplémentaire à chaque cycle. La Taq polymérase peut supporter ces températures. Les scientifiques peuvent désormais effectuer automatiquement plusieurs cycles de PCR.
Considérations
La Taq polymérase a un taux d'erreur de doublage d'ADN relativement élevé. Les autres polymérases stables à haute température ont des taux d'erreur plus faibles, mais le Taq reste le plus utilisé en raison de sa fiabilité et de sa polyvalence.